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0.25胰*白酶消化液(含EDTA,含酚紅)含 0.25%胰*白酶,溶于 Hank’s 緩沖液,添加 0.9 mM EDTA,含酚紅指示劑,經(jīng) 0.22 μm 過濾除菌。*酶在 37℃ pH 8.0 條件下消化能力*。常用*酶工作濃度為 0.25%。EDTA 可以螯合鈣鎂離子,*酶溶液中搭配 EDTA 使用可以加速細(xì)胞間連接蛋白的水解,起到增強(qiáng)消化的效果。酚紅是一種 pH 指示劑,溶液偏堿性時(shí)呈
Collagenase, TypeⅣ 膠原酶Ⅳ型含有低*酶活性,通常用于胰島細(xì)胞的制備,或者需要維持受體完整性的細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)。膠原酶分離效果好,即使有鈣、鎂離子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培養(yǎng)液配制,既操作簡便又可提高細(xì)胞成活率,終濃度200u/mL,此酶消化作用緩和,無需機(jī)械振蕩。
Collagenase, TypeⅢ 膠原酶Ⅲ型作用較緩和,能消化細(xì)胞間質(zhì)中的膠原纖維以釋放細(xì)胞,對細(xì)胞損傷小,是只此一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋*酶。
Collagenase, TypeⅡ膠原酶Ⅱ型作用較緩和,能消化細(xì)胞間質(zhì)中的膠原纖維以釋放細(xì)胞,對細(xì)胞損傷小,是*一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶。
Collagenase, TypeI 膠原酶I型分離效果好,即使有鈣、鎂離子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培養(yǎng)液配制,既操作簡便又可提高細(xì)胞成活率,終濃度200u/mL,此酶消化作用緩和,無需機(jī)械振蕩。
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