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RIPA裂解液(中)是一種經(jīng)典的動(dòng)物組織/細(xì)胞快速裂解液,通過組合離子型去垢劑和非離子去污劑對組織細(xì)胞的消化作用使組織細(xì)胞崩解釋放出蛋白質(zhì),對細(xì)胞膜、胞漿亞組分、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用。
蛋白酶抑制劑混合物(100×,不含EDTA),細(xì)胞粗提取物含有許多內(nèi)源性酶,例如磷*酶和蛋*酶,能夠降解和改變提取物中的蛋白。提高完整蛋白產(chǎn)量的最佳方法是加入這些酶的抑制劑。
PMSF 溶液(100mM)對絲*酸蛋白酶(如胰*白酶,胰*乳*白酶,凝*酶)和巰基*白酶(如木瓜*白酶)均有強(qiáng)烈的抑制作用,是常用的蛋白酶抑制劑,有效濃度為0.1~1mM。PMSF半衰期約為 30 min,樣品處理超過1h,可以補(bǔ)加一次。
磷酸酶抑制劑II cocktail(50×)為四種磷酸酶抑制劑的混合物,可抑制絲x酸/蘇x酸蛋白酶,蛋白酪x酸磷酸酶,同時(shí)可抑制酸/堿性磷酸酶等四種磷酸酶。適用于Western blot 和免疫共沉淀檢驗(yàn)磷酸化蛋白,蛋白激酶活性測定等。
紅細(xì)胞裂解液利用細(xì)胞內(nèi)外滲透壓差可導(dǎo)致細(xì)胞膜脹破的原理來裂解紅細(xì)胞,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。
RIPA裂解液(強(qiáng)),通過組合離子型去垢劑和非離子去污劑對組織細(xì)胞的消化作用使組織細(xì)胞崩解釋放出蛋白質(zhì),是一種經(jīng)典的動(dòng)物組織/細(xì)胞快速裂解液。
NP40裂解液(帶抑制劑)對胞漿亞組分、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用,有利于胞漿蛋白、核蛋白、胞漿磷酸化蛋白及細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子的提取。
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