什么是蛋白定量試劑盒?
更新時(shí)間:2023-06-09 點(diǎn)擊次數(shù):706
蛋白定量試劑盒是一種專門設(shè)計(jì)用于測(cè)定蛋白質(zhì)含量的化學(xué)試劑盒。通常使用分光光度計(jì)或熒光光度計(jì)等設(shè)備進(jìn)行測(cè)量,常見(jiàn)的包括BCA法、Lowry法、Bradford法、Biuret法等。
BCA法:
BCA全稱為比昂-考夫曼法,基于蛋白質(zhì)與銅離子在堿性條件下的還原反應(yīng),通過(guò)比色測(cè)定還原后的銅離子的吸光度來(lái)計(jì)算樣品中蛋白質(zhì)的含量。該方法操作簡(jiǎn)單,靈敏度高,適用于各種類型的蛋白質(zhì)。
Lowry法:
Lowry法是一種經(jīng)典的定量方法,常用于測(cè)定低含量的蛋白質(zhì)。該方法基于還原銅離子與酪氨酸和組氨酸等氨基酸的堿性染色反應(yīng),通過(guò)比色測(cè)定產(chǎn)生的復(fù)合物吸光度來(lái)計(jì)算蛋白質(zhì)含量。該方法靈敏度高,但對(duì)膽固醇、琥珀酸等干擾物有一定的影響。
Bradford法:
Bradford法是一種簡(jiǎn)單、快速、靈敏的蛋白質(zhì)定量方法。該方法基于考馬斯亮藍(lán)G-250與蛋白質(zhì)間的結(jié)合反應(yīng),使得溶液從棕色變?yōu)樗{(lán)色,通過(guò)比色測(cè)定藍(lán)色復(fù)合物的吸光度來(lái)計(jì)算樣品中蛋白質(zhì)的含量。該方法對(duì)多數(shù)蛋白質(zhì)都有很好的適用性,但對(duì)一些帶電較少的蛋白質(zhì)可能不夠靈敏。
Biuret法:
Biuret法是一種通用的蛋白質(zhì)定量方法,可用于各類蛋白質(zhì)的測(cè)定。該方法基于蛋白質(zhì)中的肽鍵與銅離子形成絡(luò)合物,通過(guò)比色測(cè)定絡(luò)合物的吸光度來(lái)計(jì)算蛋白質(zhì)含量。該方法操作簡(jiǎn)單、適用性廣泛。