涉及產(chǎn)品

1. EZ Trans Plus細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（Ⅱ）　貨號(hào)：AC04L011

2. EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（高效）　　貨號(hào)：AC04L091/AC04L092

3. EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（低毒）　　貨號(hào)：AC04L098/AC04L099

其他轉(zhuǎn)染產(chǎn)品

1. EZ Trans Pro細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑（GMP）　貨號(hào)：AC04L032/AC04L033/AC04L034

2. EZ Trans RNA轉(zhuǎn)染試劑　　　　　　　貨號(hào)：AC04L051

李記生物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑常見問題（一）

Q1：李記有3款轉(zhuǎn)染試劑，這3款有什么區(qū)別？和Li**對(duì)比效果如何？

A1：我司自行測(cè)試與收集客戶反饋數(shù)據(jù)，得到類似結(jié)論：

　　效率方面：EZ Trans Plus＞Li**2000≈EZ Trans(高效)＞Li** 3000＞EZ Trans(低毒)

　　毒性方面：EZ Trans(低毒)≈Li**3000＜EZ Trans Plus＜EZ Trans(高效)≈Li**2000

Q2：我們傳的細(xì)胞有抗生素，抗生素是絕對(duì)會(huì)影響轉(zhuǎn)染效率嗎？

A2：能不加盡量不加，理論上抗生素進(jìn)不到細(xì)胞內(nèi)，但是在轉(zhuǎn)染試劑的作用下，細(xì)胞的通透性增加，抗生素可能進(jìn)到細(xì)胞內(nèi)，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果完成影響。

Q3：protocol提到，要用Opti-MEM稀釋質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染試劑。不能用1640稀釋么？另外質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染試劑為什么要先稀釋然后再混合？不能把轉(zhuǎn)染試劑直接加到質(zhì)粒溶液中混合，然后再加培養(yǎng)基稀釋么？

A3：EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染液屬于陽(yáng)離子類型的轉(zhuǎn)染試劑，它與DNA形成復(fù)合物需要一定的條件，在合適的濃度下，有利于陽(yáng)離子包裹DNA形成良好形態(tài)的復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞。

　　如果直接把兩者直接混合，兩者容易很快形成聚合物，聚集相態(tài)多樣，有可能使DNA暴露在表面，不容易進(jìn)入細(xì)胞，進(jìn)而降低轉(zhuǎn)染效率。所以EZ Trans和DNA的混合順序也很重要。

　　培養(yǎng)細(xì)胞大多會(huì)用到胎牛血清，血清成分復(fù)雜，沒有人能說清成分及含量。細(xì)胞轉(zhuǎn)染液成分比較明確，但是不能確定是會(huì)不會(huì)與胎牛血清的不明成分結(jié)合，事實(shí)上這種現(xiàn)象在大多數(shù)轉(zhuǎn)染試劑中都會(huì)造成不良影響，所以在形成EZ Trans-DNA復(fù)合物過程中要避免血清的影響。

Q4：protocol提到，“24-48小時(shí)內(nèi)檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率"指的是去除含復(fù)合物的培養(yǎng)液換成含血清的培養(yǎng)基之后的24-48h，還是指加入復(fù)合物后轉(zhuǎn)染24-48h？

A4：所有時(shí)間都是從EZ Trans-DNA復(fù)合物與細(xì)胞接觸開始算。

Q5：我就是問的體內(nèi)直接轉(zhuǎn)染小鼠。你們現(xiàn)有的protocol是體外實(shí)驗(yàn)的方法?

A5：體內(nèi)直接轉(zhuǎn)染目前最多的是腺病毒，慢病毒，腺相關(guān)病毒。轉(zhuǎn)染試劑直接在體內(nèi)用的報(bào)道我們目前沒有聽過?，F(xiàn)有的做法是細(xì)胞在體外培養(yǎng)，轉(zhuǎn)染篩選后再打入體內(nèi)。

文中涉及的生物試劑產(chǎn)品都為上海李記生物科技有限公司提供，還有WB技術(shù)服務(wù)等竭誠(chéng)為您服務(wù)